Den geniale, men gærne einstøingen dr. Mabuse er innlagt på et mentalsykehus. I verden utenfor blir velkalkulerte og avanserte lovbrudd begått, og politiet er forbløffet over den sofistikerte utførelsen av dem. På mentalsykehuset har Mabuse de andre pasientene i sin vold. Gjennom hypnose og genial manipulering styrer han underverdenen, selv om han tilsynelatende ikke har noen kontakt med den. Dr. Mabuses Testamente ble bannlyst i Det tredje riket og ble Fritz Langs siste film før han flyktet fra landet, etter at propagandaminister Joseph Goebbels forsøkte å ansette ham.